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分子克隆服务

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ST-002 三泰
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1、 基因调取

 

基因调取是基因合成的一种补偿方式,通常在没有模板的前提下,客户会选

 

择进行基因合成,但是如果基因长度过长,价格也会随着上涨,周期也会变长。

 

如果客户需要的基因是来自于基因组或者 mRNA,那么就可以通过基因调取的

 

方式将该基因克隆,比基因合成的优势在于周期短,价格低,但是缺点在于有一

 

定的失败率,如果基因表达丰度太低(仅在某些特殊的细胞系中低表达,而在大

 

多数细胞系中极低表达),这样会导致基因调取失败。同时,也有突变率,因为

 

是通过 PCR 进行调取,所以有一定的突变几率(包括碱基突变,序列缺失,序

 

列增多),更多的突变和缺失是由于体内的选择性剪切和基因本体的高级结构导

 

致的。

 

对于基因调取,我这边的优势在于

 

  1. 周期短,通常 1 周左右搞定。

 

  1. 成功率高,目前与合作方每月的订单量 100-120 个左右,成功率 90%

 

以上。

 

  1. 经验丰富,长时间积累的经验使得高保真 PCR 程序的设定,材料细胞系的选取,反转录特异引物的设定都保持很高的成功率。

 

关于基因调取,客户仅仅需要提供基因的 DNA 序列,基因名称及编号(对应的

 

NCBI 基因编号),基因种属。除非特别说明,基因会构建至我特定的载体上,该

 

载体适合大部分哺乳动物真核细胞系的瞬时转染。

 

 

 

2、 载体定制化改造

 

针对客户的具体需要,将某一载体赋予客户指定的特定功能,例如添加增强

 

子、融合抗性、加入亚细胞器引导元件等等。

 

3、 亚克隆及点突变服务

 

与市场常规亚克隆服务基本类似,优势主要是这边货期比较快,一般的亚克

 

隆 4-6 天交货。

 

4、 蛋白表达优化

 

该服务主要针对两种客户,A、想极大限度提高目的蛋白在哺乳动物细胞表

 

达量的客户;B、已经构建好质粒,但是在后期实验中,通过 QPCR  能检测到

 

mRNA 水平上升,但是通过 Western-Blot,无法检测到目的蛋白的水平变化。

 

该服务主要是通过两方面的角度进行蛋白表达优化,A、选择性剪切位点的

 

密码子优化;B、专利性蛋白高表达载体。

 

该项服务可承诺:若 Western 无法检测到蛋白明显升高,不收取任何费用。

 

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